zymoresearch D4004說明書
亮點
清潔并濃縮高達5微克的DNA≥ 用0µl洗滌殘渣在2分鐘內洗脫6µl。
柱設計允許DNA以高濃度洗脫到最小體積的水或TE緩沖液中。
洗脫DNA非常適合用于PCR、DNA測序、DNA連接、核酸內切酶消化、RNA轉錄、放射性標記、陣列等。
描述
DNA Clean&Concentrator-5是一種PCR純化試劑盒,可從PCR、核酸內切酶消化、DNA修飾反應、同位素/熒光標記反應等中純化高達5µg的DNA。該產品有助于去除DNA聚合酶、修飾酶、RNA聚合酶、連接酶、激酶、核酸酶、磷酸酶、,和限制性內切酶,以及游離dNTPs及其類似物,包括放射性標記和熒光衍生物。洗脫DNA適用于PCR、陣列、連接、測序等。
耐洗滌劑性≤5%Triton X-100,≤5%吐溫-20,≤5%沙可西,≤0.1%十二烷基硫酸鈉
洗脫體積≥ 6微升
設備微量離心機
純度A260/A280>1.8
來自PCR、核酸內切酶消化、DNA修飾反應、同位素/熒光標記反應等的樣本源DNA。
大小范圍為50 bp至23 kb
產量≤ 可回收5微克總DNA。對于50bp至10kb的DNA,回收率為70-95%。對于11kb到23kb的DNA,回收率為50-70%。
問題1:有上限和無上限有什么區別?
區別是帽子。列之間的所有其他內容(最大容量、列矩陣等)都是相同的。不確定使用哪一個?這主要取決于偏好。有些人喜歡有蓋的色譜柱,以便于標記或增加安全性,而另一些人喜歡無蓋色譜柱,以加快樣品處理。
問題2:DNA樣本的最小輸入量是多少?
使用低于50µl的體積可能會導致回收率降低。Zymo研究建議用水將起始體積提高到100µl,以確保最佳結合條件。
問題3:可以重新加載多少次列?
Zymo Research建議重新加載色譜柱不超過5次,因為綁定效率可能會降低。
問題4:如果柱上裝載的DNA超過規定的最大結合容量,會發生什么情況?
由于硅膠基質堵塞,色譜柱過飽和可能導致DNA總損失。
問題5:如何處理儲存在DNA/RNA的裸DNA?
向樣品中加入等量的乙醇(95-100%),并充分混合。樣品已準備好結合,不需要DNA結合緩沖液。繼續執行步驟2。
問題6:可以回收的DNA的下限和最小量是多少?
皮克級的DNA可以恢復。該限制基于檢測方法的靈敏度。
問題7:如果在開始之前沒有向DNA清洗緩沖液中添加乙醇,我該怎么辦?
在清洗步驟中,DNA將從柱上洗脫。使用適當量的DNA結合緩沖液重新綁定樣本,并使用適當制備的洗滌緩沖液清洗柱。