使用直接檢測(cè)核苷酸和均質(zhì)熒光讀數(shù)的酶的通用、高通量篩選分析。

TRANSCREENER ADP 2檢測(cè)

TRANSCREENER AMP 2 /GMP 2檢測(cè)

TRANSCREENER GDP 分析

TRANSCREENER UDP 2檢測(cè)

透光機(jī) CGAMP 檢測(cè)

TRANSCREENER ADO CD73 檢測(cè)

對(duì)數(shù)以千計(jì)的目標(biāo)進(jìn)行分析。

Transcreener：它是如何工作的

Transcreener 是一種通用檢測(cè)方法，可用于整個(gè)核苷酸依賴(lài)性酶家族。與其對(duì)大量特定反應(yīng)產(chǎn)物（例如磷酸化蛋白質(zhì)或脂質(zhì)）使用單獨(dú)的測(cè)定法，不如對(duì)產(chǎn)生共同核苷酸產(chǎn)物的所有酶使用單核苷酸檢測(cè)測(cè)定法。例如，ADP 檢測(cè)可用作任何蛋白質(zhì)、脂質(zhì)或碳水化合物激酶的通用激酶測(cè)定方法。

Transcreener 檢測(cè)依賴(lài)于使用能夠根據(jù)單個(gè)磷酸基團(tuán)區(qū)分核苷酸的抗體對(duì)核苷酸的直接、高度特異性檢測(cè)。產(chǎn)物核苷酸與底物（例如，ADP 與 ATP 用于激酶測(cè)定）的選擇性范圍從 150 倍到 1000 倍以上。這種精確的選擇性允許在存在過(guò)量底物核苷酸的情況下檢測(cè)核苷酸酶產(chǎn)物（例如，在存在過(guò)量 ATP 的情況下檢測(cè) ADP 用于激酶測(cè)定），這是測(cè)量酶初始速度的必要條件。

為了產(chǎn)生信號(hào)，Transcreener Assays 使用同質(zhì)、競(jìng)爭(zhēng)性免疫分析形式，其中抗體與高親和力熒光示蹤劑配對(duì)。被檢測(cè)的核苷酸取代示蹤劑會(huì)導(dǎo)致其熒光特性發(fā)生變化。FP 檢測(cè)是簡(jiǎn)單的；它只需要示蹤劑和未修飾的抗體；極化的變化是由示蹤劑在移動(dòng)時(shí)增加的旋轉(zhuǎn)遷移率引起的。對(duì)于 TR-FRET 和 FI 格式，抗體與一種分子偶聯(lián)，該分子在結(jié)合時(shí)會(huì)改變示蹤熒光的強(qiáng)度，而當(dāng)示蹤劑被置換時(shí)，這種效果就會(huì)消失。

Transcreener：為什么直接檢測(cè)更適合 HTS

與任何其他核苷酸檢測(cè)分析相比，Transcreener 分析具有更少的試劑和更簡(jiǎn)單的機(jī)制，這通常需要偶聯(lián)酶將核苷酸轉(zhuǎn)化為可以與報(bào)告酶產(chǎn)生信號(hào)的產(chǎn)物。每個(gè)偶聯(lián)酶和報(bào)告酶都是被篩選化合物的潛在靶標(biāo)，這會(huì)增加假陽(yáng)性或錯(cuò)過(guò)命中的風(fēng)險(xiǎn)，并且需要額外的孔進(jìn)行反篩選。（一些 ADP 檢測(cè)分析甚至使用激酶作為偶聯(lián)酶，進(jìn)一步使它們用于激酶抑制劑篩選復(fù)雜化。）

直接檢測(cè)還意味著該協(xié)議是簡(jiǎn)單、最靈活的可用方案：運(yùn)行酶反應(yīng)，添加具有終止混合物的 Transcreener 試劑，并讀取板?；蛘呖梢栽诿阜磻?yīng)開(kāi)始時(shí)加入Transcreener檢測(cè)試劑，持續(xù)監(jiān)測(cè)酶活性；例如，用于使用“跳躍稀釋"激酶測(cè)定測(cè)量抑制劑停留時(shí)間。一些耦合方法需要額外的液體添加和孵育步驟，這使化驗(yàn)自動(dòng)化變得復(fù)雜并妨礙它們以連續(xù)模式運(yùn)行。

使用生化分析測(cè)量藥物-靶標(biāo)停留時(shí)間的指南