genovis FabRICATOR® Enzyme說明書
FabRICATOR酶以凍干粉形式提供,不添加任何防腐劑,并且有2000瓶和5000單位瓶裝,可消化2至5 mg IgG。
Fabricator(IdeS)是一種半胱氨酸蛋白酶,可在鉸鏈下方的特定位點消化抗體,孵育30分鐘后會產生F(ab')2和Fc / 2片段的均質庫。
Fabricator(IdeS)是一種*的酶,可在鉸鏈區下方的特定位點消化IgG,從而生成F(ab')2和Fc / 2片段的均質庫。除IgG外,沒有其他已知的底物。IgG會在30分鐘內被消化,如果延長孵育時間,則不會存在消化過度的風險。由于FabRICATOR在生理反應條件下消化IgG,因此可以保留免疫反應性。在37°C時可獲得佳活性,但也可在室溫下使用延長的反應時間進行消化。
Fabricator消化人類的所有亞類,以及猴子,兔子和綿羊IgG的某些類。它對小鼠IgG2a和IgG3的活性有限-對于這些抗體種類的消化,我們建議使用FabRICATORZ。
使用FabRICATOR消化IgG,然后還原,可產生三個25 kDa大小的片段(Fd',Fc和LC),可以使用LC-MS儀器輕松對其進行分析。高精度質量概況能夠檢測抗體微變體,例如糖基化,C端賴氨酸鉗制,氧化和脫酰胺等。
FabRICATOR從化膿性鏈球菌克隆 并在大腸桿菌中表達。該酶含有His標簽,分子量為37 725 Da。FabRICATOR是IdeS的重組修飾形式,由Genovis AB開發,用于要求高標準和一致性的生物技術應用。
將FabRICATOR酶凍干并通過添加水進行重構。重構后,Fabricator在+ 4-8°C穩定1個月。該產品在室溫下運輸,到達時應儲存在-20°C下。
已測試以下緩沖液與FabRICATOR消化在不同pH值下的相容性。注意,在pH 5.0以下,Fabricator酶不可逆地失活。pH 8.0以上的消化需要延長/優化的條件。
在10 mM磷酸鈉,137 mM NaCl,2.7mM KCl pH 7.4中于37°C孵育30分鐘后,一個單位可消化≥95%的1µg人IgG。