E-GL01
N-乙酰氨基葡萄糖苷酶從復(fù)雜的碳水化合物和糖蛋白上裂解所有非還原性的末端β-連接的N-乙酰氨基葡萄糖殘基。
N-乙酰氨基葡萄糖苷酶從復(fù)雜的碳水化合物和糖蛋白上裂解所有非還原性的末端β-連接的N-乙酰氨基葡萄糖殘基。
GlcNAc在雙天線，三天線和四天線寡糖上的不同鍵的切割速率很大程度上取決于相鄰殘基的空間位阻。與β（1-3）-連接的甘露糖相連的β（1-2）GlcNAc殘基以高的速率裂解，而與β（1-6）-連接的甘露糖相連的β（1-2）GlcNAc殘基在2000年以高的速率裂解。所有三種低聚糖的比率低。β（1-6）GlcNAc殘基（如果存在）以第二高的速率去除，而β（1-4）GlcNAc則以第三高速率去除。在三天線結(jié)構(gòu)上，該殘留物以第二高速率被去除。與β-連接的甘露糖連接的二等分的β（1-4）GlcNAc嚴(yán)重阻礙了其他GlcNAc殘基的裂解-裂解需要高濃度的酶和延長(zhǎng)的孵育時(shí)間。
來源：重組從肺炎鏈球菌在大腸桿菌。
EC： 3.2.1.52
替代名稱： β-N-乙酰氨基葡糖苷酶，N-乙酰-β-d-氨基葡萄糖苷N-乙酰氨基葡糖水解酶，氨基葡萄糖苷酶，己糖苷酶
內(nèi)容物：-n-acetylglucosaminidase-kit.jpg)
20 mM Tris-HCl，25 mM NaCl，pH 7.5中的N-乙酰氨基葡萄糖苷酶
5x反應(yīng)緩沖液250 mM磷酸鈉，pH 5.0
比活度： > 80 U / mg
活度： > 50 U / mL
分子量：?140,000道爾頓
pH范圍： 5-7，宜5.0
建議用法：
1.在試管中加入多達(dá)100 µg糖蛋白或1 nmole寡糖。
2.用去離子水將終體積調(diào)整為14 µL。
3.加入4 µL 5x反應(yīng)緩沖液（pH 5.0）。
4.加入2 µL N-乙酰氨基葡萄糖苷酶。
5.在37°C下孵育3小時(shí)。
注意：如果存在平分的GlcNAc或β（1-2）GlcNAc- α（1-6）Man，則將孵育時(shí)間延長(zhǎng)至18小時(shí)。
特異性：切割所有非還原性末端β-連接的N-乙酰氨基葡萄糖。平分GlcNAc會(huì)使反應(yīng)變慢。
比活測(cè)定：定義為在37℃，pH 5.0下從對(duì)硝基苯基-β-DN-乙酰氨基葡萄糖生成1 µmol對(duì)硝基苯酚（p NP）所需的酶量。
儲(chǔ)存：將酶儲(chǔ)存在4℃。
純度：每批N-乙酰氨基葡糖苷酶均按以下方法污染蛋白酶。將10 µg變性的BSA與2 µL酶孵育24小時(shí)。經(jīng)處理的BSA的SDS-PAGE分析未顯示降解跡象。
生產(chǎn)宿主菌株已經(jīng)過廣泛測(cè)試，不會(huì)產(chǎn)生任何可檢測(cè)的糖苷酶。
穩(wěn)定性：妥善存放至少12個(gè)月即可穩(wěn)定。幾天暴露于環(huán)境溫度不會(huì)降低活性。
配套產(chǎn)品：
過程控
清洗糖漿-外糖苷酶處理后從糖漿混合物中去除酶
標(biāo)記和釋放聚糖的衍生化
1.弗吉尼亞州克拉克，N。Platt和TD Betters。肺炎鏈球菌β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶基因的克隆和表達(dá)。具有修飾的糖苷配基特異性的截短酶的產(chǎn)生。 生物化學(xué)雜志270：8805-8814（1995）。
2. Dwek，RA，CJ Edge，DJ Harvey，MR Wormald和RB Parekh。糖蛋白相關(guān)寡糖的分析。Ann Rev Biochem 62： 65-100（1993）。
3.格拉斯哥，LR，JC保爾森和RL希爾。從肺炎鏈球菌 的五個(gè)糖苷酶的系統(tǒng)純化J Biol Chem 252： 8615-8623（1977）。
4. Kobata，A 。內(nèi)切和外切糖苷酶在糖綴合物結(jié)構(gòu)研究中的用途。Anal Biochem 100： 1-14（1979）。
5. Prime，S.，J。Dearnley，AM Venton，RB Parekh和CJ Edge。基于外切糖苷和內(nèi)切糖苷酶消化的寡糖測(cè)序以及產(chǎn)物的液相色譜分析。 Chromatogr A 720： 263-274（1996）。
試劑盒包括酶加反應(yīng)緩沖液。
足以進(jìn)行多達(dá)60個(gè)反應(yīng)
