Catalog # | KAP1461 |
PG-ELISA是在微量滴定板上進(jìn)行的固相酶放大敏感性免疫測(cè)定(ELISA)。該測(cè)定基于寡克隆系統(tǒng),其中使用了針對(duì)PG不同表位的單克隆抗體(MAb)的混合物。使用Kohler和Milstein的骨髓瘤細(xì)胞融合方法使產(chǎn)生抗體的細(xì)胞永生化。產(chǎn)生了分泌特異性同質(zhì)抗體的雜交瘤細(xì)胞。使用多種不同的單克隆抗體避免了高特異性,并允許具有擴(kuò)展的標(biāo)準(zhǔn)范圍和較短的孵育時(shí)間的高靈敏度測(cè)定。含有PG的標(biāo)準(zhǔn)品或樣品與包被在微量滴定孔上的捕獲單克隆抗體(MAb 1)和標(biāo)記有辣根過(guò)氧化物酶(HRP)的單克隆抗體(MAb 2)反應(yīng)。在允許形成夾心的包被的溫育期后:涂覆的MAb 1-PG-MAb 2-HRP,洗滌微量滴定板以除去未結(jié)合的酶標(biāo)記的抗體。通過(guò)發(fā)色反應(yīng)測(cè)量結(jié)合的酶標(biāo)記的抗體。加入生色溶液(TMB + H2O2)并孵育。加入終止溶液(HCl)終止反應(yīng),然后在適當(dāng)?shù)牟ㄩL(zhǎng)下讀取微量滴定板。通過(guò)測(cè)量與PG濃度成正比的吸光度,用比色法確定底物周轉(zhuǎn)量。繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,并通過(guò)從標(biāo)準(zhǔn)曲線內(nèi)插來(lái)確定樣品中的PG濃度。洗滌微量滴定板以除去未結(jié)合的酶標(biāo)記的抗體。通過(guò)發(fā)色反應(yīng)測(cè)量結(jié)合的酶標(biāo)記的抗體。加入生色溶液(TMB + H2O2)并孵育。加入終止溶液(HCl)終止反應(yīng),然后在適當(dāng)?shù)牟ㄩL(zhǎng)下讀取微量滴定板。通過(guò)測(cè)量與PG濃度成正比的吸光度,用比色法確定底物周轉(zhuǎn)量。繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,并通過(guò)從標(biāo)準(zhǔn)曲線內(nèi)插來(lái)確定樣品中的PG濃度。洗滌微量滴定板以除去未結(jié)合的酶標(biāo)記的抗體。通過(guò)發(fā)色反應(yīng)測(cè)量結(jié)合的酶標(biāo)記的抗體。加入生色溶液(TMB + H2O2)并孵育。加入終止溶液(HCl)終止反應(yīng),然后在適當(dāng)?shù)牟ㄩL(zhǎng)下讀取微量滴定板。通過(guò)測(cè)量與PG濃度成正比的吸光度,用比色法確定底物周轉(zhuǎn)量。繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,并通過(guò)從標(biāo)準(zhǔn)曲線內(nèi)插來(lái)確定樣品中的PG濃度。加入終止溶液(HCl)終止反應(yīng),然后在適當(dāng)?shù)牟ㄩL(zhǎng)下讀取微量滴定板。通過(guò)測(cè)量與PG濃度成正比的吸光度,用比色法確定底物周轉(zhuǎn)量。繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,并通過(guò)從標(biāo)準(zhǔn)曲線內(nèi)插來(lái)確定樣品中的PG濃度。加入終止溶液(HCl)終止反應(yīng),然后在適當(dāng)?shù)牟ㄩL(zhǎng)下讀取微量滴定板。通過(guò)測(cè)量與PG濃度成正比的吸光度,用比色法確定底物周轉(zhuǎn)量。繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線并通過(guò)從標(biāo)準(zhǔn)曲線內(nèi)插來(lái)確定樣品中的PG濃度。
目錄 # | KAP1461 |
格式 | ELISA法 |
標(biāo)簽 | HRP |
尺寸 | 96次測(cè)試 |
樣品類型 | 滑液,血清 |
樣本量 | 50微升 |
控制項(xiàng) | 3級(jí) |
范圍 | 10-250 ng / mL |
靈敏度 | 0.9 ng / mL |
孵化 | 室溫?fù)u晃3.25小時(shí) |
保質(zhì)期(周) | 60 |
注釋 | 僅供研究使用 |