intronbio 犬瘟熱病毒診斷試劑盒 

LiliF™ Canine Distemper virus Ag rapid test kit

LiliF™犬瘟熱病毒Ag快速檢測試劑盒 

產(chǎn)品信息

背景資料

犬瘟熱是由副粘病毒科（一種導(dǎo)致人類麻疹，腮腺炎和細(xì)支氣管炎的同一病毒家族）的單鏈RNA病毒引起的。這種疾病通過吸入傳染性很強(qiáng)，50％的時(shí)間都是致命的。盡管在許多地區(qū)廣泛接種疫苗，它仍然是狗的主要疾病，并且是犬傳染病死亡的主要原因犬瘟熱（有時(shí)被稱為犬的硬梆病）影響多種動(dòng)物家族，包括家養(yǎng)和野生物種。狗，土狼，狐貍，熊貓，狼，雪貂，臭鼬，浣熊和大型貓科動(dòng)物，還有鰭足類動(dòng)物，一些靈長類動(dòng)物和其他各種物種。

LiliF CDV Ag快速試劑盒是一種側(cè)流式免疫色譜分析試劑盒，用于快速和定性檢測犬體內(nèi)分泌物中的犬瘟熱病毒抗原。

原理

有可能的使用

• 檢測犬瘟熱病毒

解釋

套件內(nèi)容

犬瘟病毒百科

犬瘟--亦稱犬瘟熱，屬于病原性病毒。主要侵犯狗科、鼬科動(dòng)物。屬于副粘液病毒。感染后潛伏期短，死亡率約50%。在雞胚成纖維細(xì)胞、狗腎細(xì)胞的培養(yǎng)細(xì)胞中生殖其減毒的病毒可用為活疫苗。 研究犬瘟病毒的生存能力和環(huán)境，加強(qiáng)對犬病毒傳播途徑管理與預(yù)防。

中文名

犬瘟病毒

外文名

canine distemper virus（CDV）

亦    稱

犬瘟熱

屬    于

病原性病毒

癥    狀

感染后潛伏期短，死亡率約50%

犬瘟（亦稱犬瘟熱）屬于病原性病毒。主要侵犯狗科、鼬科動(dòng)物。屬于副粘液病毒。病毒粒子的直徑為115—160毫微米。鄧金（G．W．Dunkin）和萊德勞（P．P．Laidlaw）首先分離成功。感染的狗（尤其是幼狗）在4—5天的潛伏期后出現(xiàn)發(fā)熱，流淚，流鼻涕，嘔吐，腹瀉，便粘液，有時(shí)有抽風(fēng)、痙攣等癥狀。氣管、膀胱、膽道粘膜細(xì)胞內(nèi)可證明有包含體。

犬瘟病毒染色切片

死亡率約50%。在雞胚成纖維細(xì)胞、狗腎細(xì)胞的培養(yǎng)細(xì)胞中生殖其減毒的病毒可用為活疫苗。

犬瘟病毒模式圖

醫(yī)用狗貓犬瘟病毒疫苗

環(huán)境生存

1. 犬瘟病毒的環(huán)境生存力不強(qiáng)，常溫干燥環(huán)境下僅能存活幾個(gè)小時(shí)，在低溫（零上幾度）、陰暗環(huán)境下可以存活數(shù)周，在冷凍避光環(huán)境下可存活數(shù)年。

進(jìn)口的犬瘟病毒疫苗

2. 常規(guī)消毒清洗即可滅活。

3. 主要傳染途徑是吸入病犬咳出的懸浮微粒，以及接觸新鮮的分泌物（30分鐘內(nèi)），因此基本上是要與病狗近距離接觸才會發(fā)生傳染。 ^[1] 

病理研究

概述

犬瘟熱(CD)是世界范圍內(nèi)廣泛發(fā)生的一種犬的急性、高接觸性的病毒傳染病，其病原為犬瘟熱病毒(CDV)，它于1905年報(bào)道，隸屬于副黏病毒科麻疹病毒屬，其自然宿主包括大部分的食肉目動(dòng)物。它以早期雙相熱型、急性鼻卡他及隨后的支氣管炎、卡他性肺炎、嚴(yán)重的胃腸炎和神經(jīng)癥狀為特征，有些患病動(dòng)物的鼻和足墊還表現(xiàn)過度角化。它是一種傳染性強(qiáng)，臨床癥狀多樣，容易繼發(fā)細(xì)菌和其他病毒的混合感染或繼發(fā)感染，發(fā)病率高達(dá)80%，患病動(dòng)物在康復(fù)后還易留有麻痹、抽搐、癲癇樣發(fā)作等后遺癥。常規(guī)免疫接種在正常情況下是一種高度有效的預(yù)防保護(hù)措施，但據(jù)報(bào)道，犬瘟熱在德國、法國、日本、美國和芬蘭等國家常規(guī)免疫執(zhí)行很好的地區(qū)也會有不同程度的流行，這表明預(yù)防接種過的犬也可能發(fā)病，而發(fā)病機(jī)制可能存在新的變化。

犬瘟病毒外觀

流行病范圍

CDV宿主廣泛，犬科(犬、狐貍、豺、狼等)、鼬科貂、雪貂、黃鼬、白鼬、貉等)和浣熊科(海豹、熊貓、浣熊、白鼻熊等)、貓科(虎、豹、獅)動(dòng)物均易感，但犬是主要的宿主，純種犬比土種犬具有更明顯的易感性，幼小動(dòng)物比成年動(dòng)物更易感。在狐、水貂等皮毛獸養(yǎng)殖場，犬瘟熱可自然流行，雪貂自然發(fā)病的死亡率常達(dá)100%。現(xiàn)已有報(bào)道證實(shí)在患Pagets疾病的病人組織中檢出了犬瘟熱病毒核酸。由此可見，犬瘟熱的感染范圍在不斷地?cái)U(kuò)大。

傳染源為患病動(dòng)物和帶毒動(dòng)物。病毒存在于患病動(dòng)物和帶毒動(dòng)物的鼻汁、淚液、血液、腦脊髓液、淋巴結(jié)、心包液、胸水，腹水等中，通過眼鼻分泌物、唾液、尿液和糞便向外排毒。有些病犬臨床癥狀恢復(fù)后可長時(shí)間向外界排毒。

傳播途徑主要是呼吸道，其次是消化道。胎兒可通過胎盤屏障而感染，造成流產(chǎn)和死胎。本病一年四季都可發(fā)生，但以冬季和早春季節(jié)多發(fā)。近年來，隨著養(yǎng)犬業(yè)的發(fā)展，犬的交流調(diào)運(yùn)頻繁，發(fā)病周期性不再明顯。

發(fā)病機(jī)制

自然感染途徑主要是經(jīng)上呼吸道。CDV經(jīng)鼻、咽和上呼吸道侵入機(jī)體后首先在其附近的淋巴結(jié)和扁桃體中增殖，24h內(nèi)在組織巨噬細(xì)胞中增殖并擴(kuò)散至整個(gè)細(xì)胞，從局部淋巴管到達(dá)扁桃體和支氣管淋巴結(jié)。感染后2~4d病毒在扁桃體和咽后淋巴結(jié)、支氣管淋巴結(jié)中繁殖。4~6d后CDV在脾臟淋巴濾泡、胃及小腸的固有層、腸系膜淋巴結(jié)和肝臟星形細(xì)胞內(nèi)增殖，動(dòng)物表現(xiàn)為初的體溫升高和白細(xì)胞減少。感染后周出現(xiàn)病毒血癥，借助于血液循環(huán)，CDV散布到全身的淋巴器官、骨髓和上皮結(jié)構(gòu)的固有膜，身體的所有分泌物中開始向外排毒。50%的犬于感染后迅速產(chǎn)生抗體，8~9d時(shí)即可測出。在感染后8~9d病毒進(jìn)一步擴(kuò)散到上皮組織和CNS組織，身體的所有分泌物中開始向外排毒，甚至處于亞臨床感染階段的犬也開始排毒。免疫水平良好的犬感染后14d具有了足夠的CDV抗體，細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性從大部分組織中清理病毒，動(dòng)物不表現(xiàn)犬瘟熱的臨床癥狀，免疫水平差的犬在感染后9~14d病毒擴(kuò)散到其組織，包括皮膚、內(nèi)分泌腺、胃腸道上皮、呼吸道上皮、泌尿生殖道上皮等，呈現(xiàn)出病毒侵害多系統(tǒng)的臨床癥狀。CDV在腦組織中主要表現(xiàn)為對血管壁細(xì)胞的激活過程繼而引起神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞反應(yīng)，出現(xiàn)脫髓鞘性腦炎，在感染后3~4周時(shí)出現(xiàn)神經(jīng)癥狀而死亡。

出現(xiàn)癥狀

CD的臨床癥狀決定于毒株的毒力、環(huán)境、宿主年齡及免疫水平等各種因素。

（一）多系統(tǒng)癥狀 溫和型臨床癥狀比較常見，出現(xiàn)精神沉郁、厭食、雙相熱和呼吸道癥狀。雙相熱表現(xiàn)為開始體溫升高至40℃左右，持續(xù)8~18h，經(jīng)1~2d無熱期后，體溫再度升高至40℃左右，3d~6d，出現(xiàn)暫時(shí)的發(fā)熱和淋巴細(xì)胞減少。呼吸道癥狀初表現(xiàn)為漿液性鼻汁，以后發(fā)展為粘液膿性并伴隨咳嗽和呼吸困難。同時(shí)，病毒血癥可能導(dǎo)致全身性的淋巴器官感染，包括脾臟、胸腺、淋巴結(jié)、骨髓、黏膜相關(guān)淋巴組織、胃腸道黏膜固有層巨噬細(xì)胞和肝臟枯否氏細(xì)胞。

（二）皮膚損傷 可見到水泡性和化膿性皮炎，腹下皮膚常見有米粒大小的紅色丘疹或化膿性丘疹，皮屑大量脫落，唇、眼、肛門皮膚增厚，鼻鏡龜裂，母犬外陰腫脹。病程稍長者，足墊增厚、變硬甚至干裂，這是臨床診斷的重要指征之一。

（三）神經(jīng)癥狀 神經(jīng)癥狀是該病的特點(diǎn)之一，通常在病的恢復(fù)期后7~21d出現(xiàn)神經(jīng)癥狀，但也有部分犬剛開始發(fā)熱時(shí)就表現(xiàn)出來，或者在嚴(yán)重的全身癥狀出現(xiàn)后伴隨出現(xiàn)神經(jīng)癥狀。癲癇發(fā)作、四肢輕癱或后軀輕癱、肌痙攣、共濟(jì)失調(diào)是臨床上經(jīng)常看到的神經(jīng)癥狀。神經(jīng)癥狀的變化決定于病毒侵害神經(jīng)系統(tǒng)的部位，大腦受損表現(xiàn)為癲癇、好動(dòng)、轉(zhuǎn)圈和精神異常；中腦、小腦、前庭和延髓受損表現(xiàn)為運(yùn)動(dòng)或站立姿勢異常；脊髓受損表現(xiàn)為共濟(jì)失調(diào)、反射異常；腦脊膜發(fā)炎表現(xiàn)為感覺過敏、頸背部肌肉強(qiáng)直。痙攣多見于顏面部、唇部和眼瞼。CDV感染可能經(jīng)過連續(xù)的神經(jīng)系統(tǒng)傳播進(jìn)入而引起腦灰質(zhì)和白質(zhì)疾病，主要由病毒株決定。

病理變化

（一）剖解變化 CDV為泛嗜性病毒，對上皮細(xì)胞和淋巴細(xì)胞有特殊的親合力，因此病變分布非常廣泛。部分病例皮膚可出現(xiàn)水皰性或膿包性皮炎，有些病例足底表皮角質(zhì)增生；呼吸道黏膜有卡他性或濃性滲出液；消化道可見卡他性腸炎、胃粘膜出血、小腸前段出血；部分病犬脾臟和膀胱粘膜出血；在無并發(fā)癥的情況下胸腺萎縮且可能呈膠凍狀；腎上腺皮質(zhì)變性；死于神經(jīng)癥狀的病犬，腦膜充血、出血，腦室擴(kuò)張，腦脊髓液增多。

（二）組織病理學(xué)變化 陳建國等報(bào)道，對病犬進(jìn)行組織學(xué)檢查可以發(fā)現(xiàn)，在很多組織細(xì)胞中有嗜酸性的核內(nèi)和胞漿內(nèi)包涵體，呈圓形或橢圓形，直徑1~2μm。脾竇擴(kuò)張淤血、出血，白髓和紅髓淋巴細(xì)胞明顯減少。肺泡壁增厚，毛細(xì)血管擴(kuò)張、充血，肺泡腔內(nèi)充滿大量漿液、紅細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、中性白細(xì)胞、脫落的肺泡上皮細(xì)胞，在肺小葉的局部區(qū)域可見肺泡壁破裂發(fā)生肺氣腫，肺小葉間隔增寬，細(xì)支氣管壁炎性增厚。淋巴結(jié)被膜疏松、水腫、增厚，副皮質(zhì)淋巴竇和髓質(zhì)淋巴竇擴(kuò)張，其內(nèi)充滿大量漿液、巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等。腸上皮細(xì)胞變性、壞死、脫落，腸腔內(nèi)充滿大量的黏液、壞死脫落的上皮細(xì)胞、中性白細(xì)胞、單核細(xì)胞等，腺上皮粘液變形，杯狀細(xì)胞增多，有嗜酸性白細(xì)胞反應(yīng)，黏膜下層水腫、增厚，毛細(xì)血管擴(kuò)張充血、出血。扎西英派等報(bào)道脊髓灰質(zhì)中神經(jīng)細(xì)胞腫脹，染色質(zhì)溶解，神經(jīng)細(xì)胞周圍水腫，白質(zhì)有大量空泡，因脫髓鞘而呈海綿狀變化。

醫(yī)學(xué)診斷

根據(jù)流行病學(xué)資料和臨床癥狀，可以作出初步診斷。包涵體檢查是診斷犬瘟熱的輔助方法，后的確診需要依靠病毒的分離，病毒特異性抗原或抗體的檢測和特異性核酸檢測。

（一）包涵體檢查 包涵體檢查是診斷犬瘟熱的重要輔助方法。包涵體主要存在于膀胱粘膜、支氣管上皮細(xì)胞和腎盂上皮細(xì)胞內(nèi)。包涵體多數(shù)在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，1個(gè)細(xì)胞可能有1～10個(gè)多形包涵體，呈圓形或橢圓形。

（二）電鏡及免疫電鏡檢查 這是檢查確定CDV感染簡便快速的方法，制備電鏡樣品方法有：磷鎢酸（PTA）負(fù)染色法、液相免疫電鏡和超薄切片法。電鏡觀察的宜病料是糞便，該診斷法從制樣到鏡下觀察，整個(gè)過程只需要2～3h，可用于快速檢查CDV粒子。

（三）病毒的分離培養(yǎng) CDV是具有囊膜的病毒，結(jié)構(gòu)較脆，易被光和熱滅活，對環(huán)境的抵抗力非常弱，因此病毒的分離成功率很低。病料采樣部位、時(shí)間、樣品的處理、病程類型、發(fā)病動(dòng)物的抗病毒抗體的水平等因素對病毒分離成功與否有一定的影響，但主要的是分離病毒的載體是否敏感和有效。閆喜軍報(bào)道了我國犬瘟熱病毒強(qiáng)毒株HBF-1培育成功，對研究犬瘟熱發(fā)病機(jī)理以及犬瘟熱疫苗的研究具有重要意義。

（四）動(dòng)物回歸試驗(yàn) 雪貂易感，死亡率接近100%，任何途徑接種后均可在8～14d內(nèi)死亡，或者選用斷奶15d后的幼犬，皮下、肌肉或腹腔注射10倍稀釋病料懸液3～5ml。也可在雞胚、小鼠、倉鼠中適應(yīng)生長，但敏感性較低。

（五）血清學(xué)診斷 劉潤珍等用特異CD高免血清與金黃色葡萄球菌A蛋白（SPA）致敏，用協(xié)同凝集試驗(yàn)檢測CDV，僅3～5min就可獲得診斷結(jié)果。吳曙光等用CDV雞胚成纖維細(xì)胞（CEF）弱毒疫苗免疫綿羊制備瓊脂擴(kuò)散抗體，用病貉肝臟制備瓊脂擴(kuò)散抗原，建立了瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)方法。與瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)相比較檢出率提高20%。

ELISA可用于評估犬瘟熱的免疫和檢測犬瘟熱病毒。Soma T等[24]對比免疫過氧化物酶染色和抗體中和試驗(yàn)檢測抗體效價(jià)，結(jié)果顯示：免疫過氧化物酶染色可以檢測到感染早期低水平的抗體。袁書智等應(yīng)用直接熒光抗體染色法對CDV檢測，可作為CDV是否感染的指標(biāo)以及CD生前和死后診斷方法之一。Oyedele O I等建立了蝕斑減少中和法，評價(jià)疫苗接種效果和幼犬感染CDV的危險(xiǎn)性。蘇建青利用雙抗體夾心的原理，建立了犬瘟熱病毒膠體金免疫層析診斷試紙條。 ^[2] 

（六）分子生物學(xué)診斷王宏俊等采用地高莘標(biāo)記的cDNA為探針建立核酸探針檢測CDV的方法，該方法特異性強(qiáng)、靈敏度高（0.1pg），臨床初步應(yīng)用結(jié)果表明該方法*使用于臨床檢測。Frisk A L等用RT-PCR方法檢測臨床疑似病例樣品中的犬瘟熱病毒核衣殼蛋白基因，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：盡管所選取的引物的位置對RT-PCR的敏感性有很大的影響，但是這種核酸檢測系統(tǒng)在對犬瘟熱的生前診斷中表現(xiàn)出高度的特異性和敏感性。劉彩玉等根據(jù)GenBank中犬瘟熱病毒H基因保守序列設(shè)計(jì)合成了內(nèi)(FIP，BIP)、外(F3，B3)2對引物。通過對反應(yīng)條件中內(nèi)、外引物的比例、dNTP濃度、Mg2+濃度、反應(yīng)溫度和時(shí)間等條件逐一優(yōu)化，成功建立了犬瘟熱病毒的RT-LAMP檢測方法。該方法與常規(guī)RT-PCR檢測方法相比靈敏度高100倍。

預(yù)防

在CVD的預(yù)防時(shí)，要考慮細(xì)胞免疫與體液免疫兩方面的因素。

預(yù)防CDV滅活苗或麻疹病毒疫苗都不能提供動(dòng)物持久的免疫力，目前用于犬和經(jīng)濟(jì)動(dòng)物的疫苗基本上是弱毒疫苗。但是弱毒疫苗的不足之處是熱不穩(wěn)定，對某些免疫缺陷幼犬和野生食肉動(dòng)物的不安全性以及發(fā)生反應(yīng)等，因此，人們已開始使用新技術(shù)研制新型疫苗，包括基因工程亞單位苗、重組病毒苗以及核酸疫苗等。

母源抗體可通過初乳轉(zhuǎn)移給仔犬，幼犬母源抗體的半衰期是8.5d，多數(shù)仔犬的母源抗體在8~12周齡開始減弱，15周齡消失。另外可給犬注射犬瘟熱單克隆抗體、犬瘟熱免疫血清、免疫球蛋白、干擾素等。當(dāng)血清中母源抗體下降到1：20以下時(shí)較易感，1：100以上時(shí)通常不易感，因此血清中和抗體滴度1：100是免疫接種的指示滴度[。母源抗體滴度不明的幼犬，一般初免為6周齡，二免為8~9周齡，三免為10~11周齡，以后每年接種一次。 ^[2] 

治療

編輯

根據(jù)肥西縣愛心寵物醫(yī)院張景勇醫(yī)師多年的臨床實(shí)踐，對于犬瘟熱的治療，發(fā)病初期，發(fā)病中期，發(fā)病晚期的治療方案分別采取如下措施可取得較好的療效：

犬瘟熱早期，中期治療：

消化道已受犬瘟熱病毒侵害的病犬，往往進(jìn)食不好，這種情況要進(jìn)行輸液支持療法，但大量輸液會引起肺水腫，故不宜多輸，一般可按照每公斤體重20－50ml進(jìn)行輸液，有條件的可做血?dú)夥治鲇?jì)算出需要補(bǔ)充的血液離子的量：

補(bǔ)充體能：葡萄糖或葡萄糖生理鹽水加一些常規(guī)能量用藥如ATP，輔酶A，VitminC,VitminB6,Inosine等；?

對癥治療：輸液時(shí)加一些抗生素，如氨芐西林鈉加地塞米松和利巴韋林，或其他抗生素也可以，這樣做的目的是防止繼發(fā)感染；

治療神經(jīng)炎，防止出現(xiàn)神經(jīng)癥狀（有時(shí)候神經(jīng)癥狀是預(yù)防也沒有的）：用一些含VitminB12r的藥物，如科特壯之類，VitminB1;神奇康肽對由于神經(jīng)炎導(dǎo)致的抽搐有一定的作用；

其它癥狀的對癥治療：如呼吸道的咳嗽，肺炎，發(fā)燒等，或者消化道的腹瀉，便血，嘔吐等，可對癥用一些常規(guī)藥物。

治療治療原則為：對癥治療，控制細(xì)菌繼發(fā)感染，維持體液平衡，增強(qiáng)抵抗力，控制神經(jīng)癥狀。良好的護(hù)理是治療成功的關(guān)鍵。治療CD時(shí)一定在盡早大劑量使用價(jià)免疫血清的同時(shí)，進(jìn)行以防止繼發(fā)感染為中心的對癥治療與增強(qiáng)機(jī)體免疫功能的治療，對于表現(xiàn)出神經(jīng)癥狀的病犬，治療的意義不大，癥狀進(jìn)一步惡化者，可以考慮--。

另外可配合中藥治療如：金銀花12g，連翹12g，板藍(lán)根12g，黃柏15g，黃芩12g，水牛角15g，玄參12g，生地12g，知母12g，甘草15g，水煎，1d1劑，分2次經(jīng)口給予。以上方法連用5d后，觀察病犬情況，再根據(jù)情況進(jìn)行治療。

另一些新的研究報(bào)道如：Alloferon1是從麗蠅體內(nèi)分離出的活性多肽，體內(nèi)試驗(yàn)結(jié)果表明對犬瘟熱病毒感染的小鼠有明顯的保護(hù)作用，有望成為犬瘟熱防治的一種新型藥物。口服苯妥英鈉與靜脈內(nèi)注射鹽酸普魯卡因聯(lián)合應(yīng)用治療神經(jīng)型犬瘟熱有良好的效果。體內(nèi)外試驗(yàn)證明利巴韋林（RIB）能夠抑制麻疹病毒的復(fù)制。EICAR是利巴韋林的類似物，在抑制CDV復(fù)制方面的活性強(qiáng)于利巴韋林，也同樣均有濃度和時(shí)間依賴性。金絲桃素為藤黃科金絲桃屬多年生草本植物的提取物，在先毒后藥情況下可以有效抑制犬瘟熱病毒的增殖。