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immuquest IQ479說(shuō)明書(shū)

 更新時(shí)間:2019-02-28 點(diǎn)擊量:1525

immuquest IQ479說(shuō)明書(shū)

CD44抗體[156-3C11]

流式細(xì)胞儀抗CD44:抗體(156-3C11)(IQ479)系列稀釋:紫色同種型陰性對(duì)照,粉紅色1/10稀釋

目錄號(hào):IQ479

£226.00

目標(biāo)抗原

CD44

 

主要說(shuō)明

小鼠抗CD44 [156-3C11]

 

目錄編號(hào)

IQ479

 

數(shù)量

0.1毫升

 

濃度

3.2mg / ml的

 

克隆

156-3C11

 

主辦

老鼠

 

同型

的IgG2a

 

免疫原

刺激人體白細(xì)胞

 

特異性

該抗體對(duì)CD44H分子的表位3具有特異性

 

物種反應(yīng)性

人類,狒狒

 

純化

蛋白質(zhì)A.

 

格式

PBS中純化的抗體+ 0.1%疊氮化na

 

應(yīng)用

IHC-P,流式細(xì)胞

 

稀釋液

抗體稀釋?xiě)?yīng)通過(guò)滴定確定,但作為指導(dǎo),嘗試以1:10進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)

 

參考

白細(xì)胞分型V,牛津大學(xué)出版社(1995)

 

數(shù)據(jù)庫(kù)

Entrez Gene:101008690狒狒

Entrez Gene:960人類

Omim:107269人類

SwissProt:P16070 Human

Unigene:502328人類

 

也稱為

LHR抗體; BA-1抗體; CD44抗體; CD44抗體; CD44抗原抗體; CD44分子(印度血型)抗體; CD44分子抗體; CD44_HUMAN抗體; CDw44抗體;細(xì)胞表面糖蛋白CD44抗體;硫酸軟骨素蛋白多糖8抗體;抗體CSPG8抗體; ECMR-III抗體; Epican抗體;細(xì)胞外基質(zhì)受體III抗體; GP90淋巴細(xì)胞歸巢/粘附受體抗體; HCELL抗體;造血細(xì)胞E-和L-選擇素配體抗體;硫酸乙酰肝素蛋白多糖抗體; Hermes抗原抗體;歸巢功能和印度血型系統(tǒng);抗體; HSA抗體; HUTCH-I抗體; HUTCH1抗體;透明質(zhì)酸受體抗體; IN抗體; MC56抗體; MDU2抗體; MDU3抗體; MGC10468抗體; MIC4抗體; MUTCH1抗體; PGP-1抗體; PGP -I抗體; PGP1抗體;吞噬糖蛋白1抗體;吞噬糖蛋白I抗體
 

本產(chǎn)品僅供研究使用。不用于治療或診斷用途。

免疫熒光方案 - 甲醛固定

   1.從Tcunit收集細(xì)胞,并用吸力從培養(yǎng)皿中取出培養(yǎng)基。
   2.用1x PBS洗滌并取出。
   3.在室溫下在軌道振蕩器上將細(xì)胞在預(yù)熱(37℃)對(duì)甲醛中孵育12分鐘。
   4.去除PFA并在室溫下在1x PBS中的0.5%Triton X-100中孵育5分鐘。
   5.準(zhǔn)備封閉試劑,這也是抗體稀釋劑。
   6.在室溫下用1x PBS洗滌細(xì)胞2次,在軌道振蕩器上洗滌4分鐘/洗滌。
   7.在室溫下用1%NCS和1x PBS封閉30分鐘。
   8.準(zhǔn)備一抗(50μl/蓋玻片)和濕潤(rùn)染色室。
   9.在室溫下用1x PBS洗滌細(xì)胞2次并短暫風(fēng)干。
  10.在室溫下在黑暗的染色室中與一抗孵育1小時(shí)。在此期間準(zhǔn)備二抗。
  11.用1x PBS洗滌細(xì)胞5次(每個(gè)燒杯更換5個(gè)燒杯/ 5個(gè)計(jì)數(shù))
  12。在室溫下在黑暗的染色室中與第二抗體孵育1小時(shí)。
  13.用1x PBS洗滌細(xì)胞5次。
  14.登上達(dá)皮。

溶液(染色當(dāng)天新鮮制備)。

    * 1x磷酸鹽緩沖鹽水。
    *封閉試劑:1x PBS中1%NCS(使用新鮮的10x PBS)。
    *固定液:3.5%對(duì)甲醛。

1.75g PFA在20ml d.H2O中加5滴1M NaOH。在50-60℃的熱板上攪拌直至溶解。加入4滴IN HCl并檢查pH指示條。PH值應(yīng)為7.4。完成體積,d.H20至25ml,加入25ml 2xPBS。在添加到蓋玻片之前檢查pH值。


免疫熒光方案 - 甲醇/丙酮固定

   1.從TCunit收集細(xì)胞,并用吸力從培養(yǎng)皿中取出培養(yǎng)基。
   2.用1x PBS洗滌并取出。
   3.用冷甲醇:丙酮1:1在冰上固定細(xì)胞10分鐘。
   4.制備阻斷試劑,這也是抗體的稀釋劑。
   5.取出固定劑并在室溫下用1x PBS洗滌細(xì)胞3次,在軌道振蕩器上洗滌4分鐘。
   6.在室溫下用1%NCS和1x PBS封閉30分鐘。
   7.準(zhǔn)備一抗(50?l /蓋玻片)和濕染色室。
   8.在室溫下用1x PBS洗滌細(xì)胞2次并風(fēng)干約7分鐘。
   9.在室溫下在室溫下與一抗孵育1小時(shí),在染色室中避光。在此期間準(zhǔn)備二抗。
  10.用1x PBS洗滌細(xì)胞5次(每個(gè)燒杯更換5次燒杯/ 5次計(jì)數(shù))
  11。在室溫下,在染色室的黑暗中與第二抗體孵育1小時(shí)。
  12.用1x PBS洗滌細(xì)胞5次。
  13.登上達(dá)皮。

溶液(染色當(dāng)天新鮮制備)

    * 1x磷酸鹽緩沖鹽水。
    *封閉試劑:1x PBS中1%NCS(使用新鮮的10x PBS)。
    *固定液:甲醇:丙酮1:1冰冷。



Western Blotting Protocol

   1.將凝膠轉(zhuǎn)移到PDVF或硝酸纖維素膜上
   2.將膜置于封閉緩沖液中的塑料托盤中攪拌1小時(shí)
   3.在洗滌緩沖液中沖洗
   4.在洗滌緩沖液和一抗中孵育1小時(shí)
   5.洗滌6次X用洗滌緩沖液洗滌5分鐘
   6.在洗滌緩沖液和二抗中孵育1小時(shí)
   7.用洗滌緩沖液洗滌6X 5分鐘
   8.檢測(cè)(例如ECL,Amersham根據(jù)制造商的說(shuō)明)

洗滌緩沖液
PBS + 0.1%Tween 20 

阻斷緩沖液
洗滌緩沖液+ 5%奶粉

所用抗體的濃度取決于每種抗體,抗原的量和所用的檢測(cè)方法。通常,稀釋在稀釋的幾百倍稀釋到幾千倍的范圍內(nèi),但通常必須憑經(jīng)驗(yàn)確定。