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TopoGEN 公司是一家專門為拓?fù)涿秆芯刻峁┰噭┖驮噭┖小Ｔ噭┖锌梢杂行У胤治鐾負(fù)洚悩?gòu)酶 I ， II 和旋轉(zhuǎn)酶，分析細(xì)胞內(nèi)的拓?fù)湟种埔约懊枥L拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑的特性。另外公司還提供 DNa c底物，拓?fù)湟种苿┖涂贵w等。
 

Human Topoisomerase IIα  

人拓?fù)洚悩?gòu)酶IIα

人類拓?fù)洚悩?gòu)酶IIα產(chǎn)品描述（Top2a）

我們使用TopoGEN的員工開發(fā)的專有方法來凈化TopoIIα。純化的酶*不含拓?fù)洚悩?gòu)酶I污染物和核酸酶。它改變了兩步中*拓?fù)洚悩?gòu)體的連接數(shù)，SDS-PAGE檢測到的主要多肽為170 kDa; 沒有其他條帶在過載凝膠上可見。

拓?fù)洚悩?gòu)酶II質(zhì)量控制測試

核酸酶污染：通過測試線性kDNA和線性質(zhì)粒DNA形成來測定。孵育1μg的連接的KDNA或超螺旋的pUC19DNA 4小時。 在37℃（在 topo II測定條件下，有或沒有ATP）。通過在抑制topo II活性的條件下測定超螺旋DNA的松弛來評估與topo I的交叉污染。過量純化的酶在不存在ATP（含和不含Mg ++）的情況下與pRYG DNA一起在37℃下孵育2小時。在這些條件下，不能檢測到pRYG超螺旋DNA的松弛。


當(dāng)SDS-PAGE凝膠用純蛋白質(zhì)超載時，觀察到170kDa的單條帶。zui終分?jǐn)?shù)中沒有180 kDa的topo II形式。 （蛋白質(zhì)濃度從批次變化，但通常在5-50ug / ml的范圍內(nèi)）。Topo IIa可以以2-10單位/ ul供應(yīng)（1單位將在30分鐘內(nèi)在37℃下將0.2ug KDNA脫鹽30分鐘C）。Topo IIa 

的zui終部分 在以下緩沖液中脫離FPLC柱：10％甘油，50mM Tris（pH 7.7），1mM EDTA和EGTA，650M NaCl。拓?fù)洚悩?gòu)酶II測定條件
 

在topo II反應(yīng)緩沖液（50mM Tris-Cl，pH8.0,120mM KCl，10mM MgCl 2，0.5mM ATP，0.5mM二硫蘇糖醇）中，使用zui終體積為20-30μl的細(xì)胞質(zhì)DNA底物進(jìn)行蛻膜測定， 0.2μgKDNA。用5μl（每20μl反應(yīng)體積）終止緩沖液（5％sarkosyl，0.0025％溴酚藍(lán)，25％甘油）終止反應(yīng)。在含有0.5μg/ ml溴化乙錠的1％瓊脂糖凝膠上分析反應(yīng)產(chǎn)物。當(dāng)凝膠運行時，可以用手持式紫外線光源輕松監(jiān)測2.5 kb DNA小環(huán)脫氮產(chǎn)物的分辨率。

運輸和存儲說明：

酶在干冰上運輸，應(yīng)儲存在-70°C。我們還建議在*次解凍之后將酶等分（反復(fù)循環(huán)冷凍/解凍會導(dǎo)致活動喪失）; 酶活性穩(wěn)定1-2天（不再）。

我們公司zui大優(yōu)勢是強大的采購，

1：基本什么都能進(jìn)口，血清，抗體，耗材，還有部分限制進(jìn)口的，

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5：良好的信譽，大部分客戶我們提供貨到付款服務(wù)，客戶包括清華，北大 交大 復(fù)旦，中山等100多所大學(xué)，ROCHE，阿斯利康，國藥 ，fisher等500多家公司

6：我們*代理的品牌有：Antibody Research Corporation，arcticzymes，Biorelevant，AmberGen, Inc. ，clemente-associates，clodronaiposomes，Columbia Biosciences，enzyme research，Gene Bridges GmbH，Genovis，AmberGen, Inc.  Biotechnology GmbH，Haematologic Technologies HTI Haemtech，hookelabs，Immudex，Innovative Research of America，inspiralis ，List Biological Laboratories, Inc.，lumafluor，Microsurfaces，multiplicom，nanotools，Pel-Freez Biologicals，pentapharm，progen，Protein Ark，QA-Bio,Inc，QA-Bio,IncQuickZyme Biosciences，Teknova，TriLink BioTechnologies, Inc.，Zyagen Laboratories 等

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